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一、微生（shēng）物實驗室注意事項

1、工作室要（yào）矮小平整、光滑、無凹凸不平或棱角、四壁及屋（wū）頂用不透水之材（cái）質，便於擦洗及殺菌（jun1）。

2、室內采光麵積應大，從室外應能看到室（shì）內的情況。

3、為（wéi）保證無菌室的潔淨，無菌室周（zhōu）圍需（xū）設（shè）緩衝走廊，走廊旁再設緩衝間，其麵積可小於無菌室。

4、無菌室、緩衝走廊及緩衝間均（jun1）設有日光燈及紫外（wài）燈，殺菌紫外燈離工作台以一米為宜，其電源（yuán）開關應設在室外。

5、無菌室與緩衝間進出口應（yīng）設推拉門，門與窗平齊，門縫要（yào）封緊，兩（liǎng）門要錯開，以免空氣對流造成汙染。

二、使用無菌室注意事項

1、無菌（jun1）室要保持清潔整齊，室（shì）內（nèi）僅存（cún）放（fàng）必（bì）要的檢驗用品，如：酒精（jīng）燈、酒精棉、火柴、鑷（niè）子、接種針、接種（zhǒng）環、記號鉛等。

2、室內檢驗用具及（jí）桌凳應保持固定位置，不隨便移動。

3、每2周用2%消（xiāo）毒液（二（èr）氧化氯等）水溶液擦拭工作台、門、窗、桌（zhuō）凳（dèng）及地（dì）麵，然後用（yòng）二氧化氯溶液噴霧消毒（dú）空氣或過氧乙酸熏蒸，紫外燈殺（shā）菌。

4、定期檢查室內空（kōng）氣無菌狀態，進行細菌和黴菌的檢查（chá）。

5、無菌室殺菌前應將所有（yǒu）物品置於操作之部位，然後打開紫外燈殺菌半（bàn）小時（shí），時間一到，關閉紫（zǐ）外燈待用。

6、操作應嚴格按照無菌操作規定進行，操作少說話，不喧嘩，以（yǐ）保持環境（jìng）的無菌狀態。

三、配製培養基注意事項

1、滅（miè）菌時嚴格按照（zhào）規定（dìng）加熱、加壓，切忌時間過長壓力過高，否則會造成營養成分（fèn）的破壞。

2、切忌使用銅鍋、鐵鍋配製培養基。

3、培養基不能（néng）二次高壓滅菌。

4、劃線（xiàn）用培養基可放入冰（bīng）箱或培（péi）養箱除去水分。 

四、無菌操作注意事項

1、進入無菌室之前先進行空氣消毒，工作人員進入無（wú）菌室以前，必須於緩衝間更（gèng）換消毒過的工作服（fú）、工作帽及工作鞋。

2、動作要輕，盡量減（jiǎn）少走動，以免攪動空氣。

3、操作要靠近酒精燈火焰區，使用吸管要用吸球。

4、接（jiē）種環/接種針用前用後進行火焰（yàn）滅菌。

5、工作結束作好終末消毒，所有培養物均應高壓滅菌後（hòu）再（zài）扔掉，以免汙染環境。

 

五、菌落總數測定注意事項

1、選取樣品要有代表性，如為固體樣品要多采幾個部位，液體檢（jiǎn）樣要混勻。

2、每（měi）次做樣從開始到（dào）結束都要進行超淨台空氣淨度的監測，同時對所有滅菌物品做空白對照。

3、為減少稀釋倍數的誤差，在做連續遞增稀釋時，每一稀（xī）釋液應充分振（zhèn）搖（yáo）使其均勻，同時每一稀釋度換（huàn）一支吸管。

4、在進行連續稀釋時，應將吸管內液體沿壁流入，勿使（shǐ）吸（xī）管尖端觸及（jí）稀釋液。

5、傾倒（dǎo）營養瓊脂（zhī）培養基（jī）平板時，溫度要在46±1℃之間，數量要在（zài）15ml左右為宜，不要太多太少。

6、培養物48h培養後培養基失重不超過15%，培養箱（xiāng）內要放水。

7、檢樣加入平皿後應立（lì）即傾注培養基並旋轉混勻，一般從稀釋到傾注不超過20分鍾。

8、平皿內如有鏈狀（zhuàng）菌落生長時（shí）：菌（jun1）落（luò）之間無明顯界限且僅有一條鏈可視為一個（gè）菌落，如為（wéi）不同來源的幾條鏈則將每條鏈各做一個菌落記。

9、做菌落記數時平板裏所有的菌落都要記數。

 

六、大腸菌群注意事項

1、對乳糖膽鹽管產氣的觀察隻要有氣泡往上冒就算產氣（qì）。

2、在伊（yī）紅美蘭瓊（qióng）脂平板上挑（tiāo）取菌落時一定要選典型菌落。

 

七（qī）、黴（méi）菌、酵母菌檢驗注意事項

1、稀（xī）釋樣品時用無菌水。

2、3天觀察（chá）時把所有的酵母菌做標記。

3、如果（guǒ）有（yǒu）黴菌被培養出（chū），請（qǐng）不要把皿蓋隨便打（dǎ）開，待培（péi）養物高壓（yā）滅菌後再清洗。

 

八、壞（huài）包分析（xī）注意事項

1、對已開包的酸包脹包要馬上轉移到無菌瓶（píng）中（zhōng），已防二次汙染。

2、根據壞（huài）包的不（bú）同表現狀態適當（dāng）的選擇培養項（xiàng）目。

3、做微（wēi）生物培養的同時測定感官（guān）、理（lǐ）化指標，注（zhù）意其有何變（biàn）化。

 

九、商業無菌注意事（shì）項

1、要（yào）求有厭氧培養的一（yī）定要在厭氧環境下培養。

2、取樣測pH值，要與同批（pī）正常（cháng）樣相比（bǐ），看是否有顯著差（chà）異。

3、對pH 值有可疑的樣品都要做塗片染色鏡檢，與同批正（zhèng）常樣相比，看是否（fǒu）有明顯的微生物（wù）增殖現象。

4、保溫期間出現的（de）脹（zhàng）包，漏包、或開包發現PH、感（gǎn）官異（yì）常、變質（zhì），進一步鏡檢發現有異（yì）常數量細菌（jun1）的樣品均應（yīng）進行劃線培養。